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基于顺磁微粒的金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫层析试纸条的制备
张琨1,王伟华2,万 一1颜真2訾静1,王军1,高磊
陕西省微生物研究所分子生物学研究中心,陕西西安710043;2,第四军医大学药学院药物基因组学教研室,
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摘要:

采用基于顺磁微粒标记抗体的免疫层析法,制备金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)'决 速定量检测的层析试纸条。利用EDC和NHS交联活化顺磁微粒,对顺磁微粒包被抗体 的体系进行优化;根据双抗夹心法原理制备免疫层析试纸条,对制备的SEB免疫层析试 纸条进行测试研究。优化的顺磁微粒偶联抗体的缓冲体系为pH9.0,5mmol/L硼酸, 0.05%Tween-20;磁珠包被抗体量为125/2mg磁珠,封闭剂为0.25%的脱脂牛奶,磁珠 保存液为5mmoI/L硼酸、0.05%Tween-20+0.05%TritonX一1佣,0.01%NaN3,0.5% BSA,pH9.0;建立的SEB顺磁微粒免疫层析试纸条T线抗体浓度为1mg/mL,最低检测限 为Ing/mL,磁信号检测显示,该试纸条在SEB浓度0.1、1000ng/mL范围内具有很好的 线性关系。SEB顺磁微粒免疫层析法具有简单,决速、灵敏度高、可定量的特点,可应用于 SEB的,决速检测。

关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素B;顺磁微粒;免疫层析
发表年限: 2016年
发表期号: 第3期